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  • 線粒體膜電位熒光探針在實(shí)際使用中具有以下4個(gè)優(yōu)勢(shì)
  • 點(diǎn)擊次數(shù):1129 更新時(shí)間:2022-09-27
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  •   線粒體膜電位熒光探針是我們的膜標(biāo)記1-43的縮寫,化學(xué)上稱為N-(3-三乙基氨基丙基)-4-(4-(二丁基氨基)苯乙烯基)吡啶鎓二溴化物。它是一種水溶性膜探針,屬于苯乙烯基染料家族。它廣泛用于細(xì)胞生物學(xué)和神經(jīng)生物學(xué),因?yàn)樗鼘?duì)細(xì)胞的毒性極小。線粒體膜電位熒光探針在水性介質(zhì)中幾乎不發(fā)熒光,并且在與膜結(jié)合后強(qiáng)烈發(fā)熒光。它用標(biāo)準(zhǔn)熒光素光學(xué)濾光片有效激發(fā),并且當(dāng)與質(zhì)膜結(jié)合時(shí)表現(xiàn)出強(qiáng)烈的熒光信號(hào)。線粒體膜電位熒光探針經(jīng)常被用于量化神經(jīng)元中的胞吐作用。
     
      線粒體膜電位熒光探針的優(yōu)勢(shì):
      線粒體膜電位熒光探針是一種新型的用來(lái)監(jiān)測(cè)線粒體膜電位變化的熒光探針,是JC-1的*替代物。與JC-1相比,具有以下幾個(gè)重要優(yōu)勢(shì):
      1、溶解性得以改良,在水溶液中形成沉淀可能性明顯降低;
      2、使用更方便,簡(jiǎn)化步驟將手動(dòng)操作時(shí)間最小化;
      3、熒光信號(hào)更高,改良的信號(hào)與背景熒光的信噪比;
      4、結(jié)果更穩(wěn)定,優(yōu)化探針以保證更連續(xù)性和穩(wěn)定性結(jié)果。
     
      使用方法:
      1、染色液制備:
      ①儲(chǔ)存液制備:用DMSO或無(wú)水乙醇配置濃度1~5 mM的儲(chǔ)存液。例如,取10mg 熒光探針(Mw:460.31 g/mol)溶于4.35ml 無(wú)水DMSO中,充分溶解,即得到5mM的儲(chǔ)存液。
      ②工作液制備:用合適的緩沖液稀釋儲(chǔ)存液,調(diào)整到合適的工作濃度。
     
      2、染色方法:
      對(duì)于細(xì)菌染色,最好取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的健康細(xì)菌,用無(wú)菌PBS或其他適當(dāng)平衡鹽緩沖液稀釋到~1 x 106cells/ml。也可直接從細(xì)菌培養(yǎng)液中取適量的細(xì)菌不經(jīng)清洗進(jìn)行稀釋。細(xì)菌染色用熒光探針的工作濃度可為30μM,室溫染色15~30min。
  • 上一篇:為了保證足夠強(qiáng)的緩沖能力,在配制緩沖劑時(shí)我們要做到這幾點(diǎn)
  • 下一篇:細(xì)胞膜熒光探針在日常使用中有哪些熒光染料?
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